無(wú)血清培養(yǎng)基

(serum 

free 

medium,SFM)

:

是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞

在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)繁殖的合成培養(yǎng)基。

但是它們可能包含個(gè)別蛋白或大量蛋白

組分。

雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細(xì)胞培養(yǎng)

的要求，

但對(duì)有些實(shí)驗(yàn)卻不適合，

如觀察一種生長(zhǎng)因子對(duì)某種細(xì)胞的作用，

這時(shí)

需要排除其他生長(zhǎng)因子的干擾作用。

而血清中可能含有各種生長(zhǎng)因子；

又如需要

測(cè)定某種細(xì)胞在培養(yǎng)過程中分泌某種物質(zhì)

（抗體、

生長(zhǎng)因子）

的能力；

或者要大

規(guī)模的培養(yǎng)某種細(xì)胞，以獲得它們的分泌產(chǎn)物。

 

 

 

 

無(wú)血清培養(yǎng)基的基本配方

:

基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。

 

用

于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，多數(shù)呈貼壁生長(zhǎng)或兼性貼壁生長(zhǎng)；

而當(dāng)其在無(wú)血清、

無(wú)蛋白培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)，

由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子

如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白，細(xì)胞往往以懸浮形式生長(zhǎng)。

 

 

 

 

添加組分

: 

 

 

1. 

促貼壁物質(zhì)：許多細(xì)胞必須貼壁才能生長(zhǎng)，這種情況下無(wú)血清培養(yǎng)基中一定

要添加促貼壁和擴(kuò)展因子，

一般為細(xì)胞外基質(zhì)，

如纖連蛋白、

層粘連蛋白等。

它

們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子，

對(duì)許多細(xì)胞的繁殖和分

化，

起著重要作用。

纖連蛋白主要促進(jìn)來(lái)自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化，

這些細(xì)胞

包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、

CHO

細(xì)

胞、成肌細(xì)胞等。

 

 

 

2.

 

促生長(zhǎng)因子及激素：針對(duì)不同細(xì)胞添加不同的生長(zhǎng)因子。激素也是刺激細(xì)胞

生長(zhǎng)、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì)，有些激素是許多細(xì)胞*的，如胰島素。

 

 

 

3.

 

酶抑制劑：培養(yǎng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，需要用胰酶消化傳代，在基中

*須含酶抑制劑，

以終止酶的消化作用，

達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。

zui常用的

是大豆胰酶；抑制劑。

 

 

 

4.

 

結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白：常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添

加比較大，

可增加培養(yǎng)基的粘度，

保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷。

許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無(wú)

血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。

 

 

 

5.

 

微量元素：硒是zui常見的。

基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個(gè)別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細(xì)胞培養(yǎng)的要求，但對(duì)有些實(shí)驗(yàn)卻不適合，如觀察一種生長(zhǎng)因子對(duì)某種細(xì)胞的作用，這時(shí)需要排除其他生長(zhǎng)因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長(zhǎng)因子；又如需要測(cè)定某種細(xì)胞在培養(yǎng)過程中分泌某種物質(zhì)（抗體、生長(zhǎng)因子）的能力；或者要大規(guī)模的培養(yǎng)某種細(xì)胞，以獲得它們的分泌產(chǎn)物。 基的基本配方:基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。 用于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)，多數(shù)呈貼壁生長(zhǎng)或兼性貼壁生長(zhǎng)；而當(dāng)其在無(wú)血清、無(wú)蛋白培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)，由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白，細(xì)胞往往以懸浮形式生長(zhǎng)。
添加組分: 1. 促貼壁物質(zhì)：許多細(xì)胞必須貼壁才能生長(zhǎng)，這種情況下基中一定要添加促貼壁和擴(kuò)展因子，一般為細(xì)胞外基質(zhì)，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子，對(duì)許多細(xì)胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進(jìn)來(lái)自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化，這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。 2. 促生長(zhǎng)因子及激素：針對(duì)不同細(xì)胞添加不同的生長(zhǎng)因子。激素也是刺激細(xì)胞生長(zhǎng)、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì)，有些激素是許多細(xì)胞*的，如胰島素。 3. 酶抑制劑：培養(yǎng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，需要用胰酶消化傳代，在基中*須含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。zui常用的是大豆胰酶；抑制劑。 4. 結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白：常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加比較大，可增加培養(yǎng)基的粘度，保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的基都含有牛血清白蛋白。 5. 微量元素：硒是zui常見的。